中药指纹图谱质控技术

　　中药在我国有悠久的历史，从神农尝百革开始就利用中药治病。传统的中药在质量控制上缺乏科学的检验手段，可谓“丸散膏丹，神仙难辨”。中药成分复杂，其有效部位往往不是某种单一成分，而是群体。从群体中分离出的某种单一成分，疗效反而可能会降低甚至消失。以某种单一成分作为质量控制指标越来越不适应中药质量控制的要求。

　　近年来，随着现代分析方法。检测手段的不断进步及对中药系统研究的不断深入，在阐明中药化学成分的多样性和复杂性方面取得了很大的进展，中药指纹图谱的出现，为解决质量控制问题带来了希望。

　　1研究现状中药色谱指纹图谱是一种综合的鉴别手段，它建立在中药成分系统研究的基础上。20世纪70年代有学者尝试用TLCS对中成药进行分析，因主客观条件的限制、技术和时机均不成熟，没得到公认而沉寂；中国药典1990版中药及中成药的TLC设置对照药材，初步解决化学对照品少、多植物共有的化学对照品专属性差的问题，其实已具备了指纹图谱的雏形。当前色谱技术的多样化和检测能力的增强为指纹图谱研究和应用提供了良好的工作平台。指纹图谱技术涉及的方法种类繁多，包括TLC、TLCSHPLC、HPLC－MS、GC、CC－MS、HPCE、IR、NMR及X-射线衍射等，其中色谱技术是主流。尤其是TLCS、HPLC和GC已是公认的三种常规的分析手段。随着科学技术的发展，色谱分析仪器的完善与提高，在克服自身固有缺陷，发挥自身优势方面有了长足发展，成为三种互相补充、相互结合分析手段。其中HPLC法随新的高效通用型检测器的发展，使得其适用性和灵敏度得到显著提高，从而使复杂样品的分析成为可能。这些新设备新技术的应用，将使中药及其制剂指纹图谱的建立更加有效。

　　中药指纹图谱突破传统的线性思维，根据色谱指纹图谱的模糊属性，着眼于宏观规律性的特征分析，在药理、药效被确认的前提下，凭借其指纹图谱，既可确认产品的真伪，同时又能判断质量的稳定与否。因此，中药指纹图谱已成为目前控制中药质量最有效的方法。

　　中药指纹图谱是指某种（或某产地）中药材或中成药经适当的处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标志该中药材或中成药特征的色谱图。这样得到的指纹图谱应该既具有能判断该药材真伪的“共性”，又有能反映不同产地、不同采收期。不同工艺的“特性”。从而能够从整体上控制中成药或中药材的质量。目前，指纹图谱已成为国际上公认的控制中药或天然药物质量的最有效手段。美国FDA。英国草药典、印度草药典、德国药用植物学会、加拿大药用植物学会均接受色谱指纹图谱的质控方法。国家药品监督管理局于2000年第四季度下发《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求》，率先要求中药注射剂推行指纹图谱的质控办法，这将促进我国中药质控的发展。

　　2建立指纹图谱的方法

　　技术路线

　　（1）收集中成药样品及其原料药材、中间半成品等，作为研究对象。每个研究对象至少需要20批。

　　（2）对研究对象进行化学预处理：用不同极性的溶剂提取、分离，得到测试样。

　　（3）对测试样进行色谱分析（如1LC、HPLC、GC、GC－MS、LC－MS等），得到样品的色谱图。同时有针对性地进行药效学试验。

　　（4）采用计算机图谱解析技术对测试样色谱图进行解析和处理，获得指纹特征。

　　（5）寻找指纹特征与药效之间的对应关系，确立指纹图谱。

　　（6）用指纹图谱评价药品质量的稳定性（包括与市场同类产品进行对照比较）。

　　注意问题在从药材到中成药的研究过程中，最好能分别制作中药材、中间半成品和中成药的指纹图谱。对于复方制剂，由于成分复杂，在一张图谱不能反映全貌的情况下，可以分成几张图谱。用适当的方法将不同极性的成分分开，分别制作指纹图谱。不同的提取工艺会使提取的有效成分有差异。应该分别比较不同提取工艺的图谱，从而确定其共有峰和非共有峰。对于多种来源、不同产地、不同采收期和不同炮制方法的药材，所含的有效成分会有差异，应该比较其指纹图谱的差异。确定其共有峰和非共有峰，从而建立起摫曜贾肝仆计讛。对于中药材，由于中医入药名称相同的药材可以来源于不同种属。因此，应选择地道产品作为图谱的主要研究对象。为保证原料质量，最好能发展规模化和规范化种植。对于野生药材，要尽量研究进行驯化家种、规范化种植，以保证质量。值得指出的是：国内目前对如何获得中药指纹图谱，技术上并无争议。但对如何解析和处理指纹图谱使其能应用于生产实践却争议很大。笔者认为，指纹图谱存在着整体性和模糊性。应注意图谱的共有峰和特异峰。在判断上不能只注意某个或某几个峰，要注意全貌比较。仅靠肉眼的判断往往难以确定真伪。利用计算机图谱解析技术，可以较好地解决这一问题。目前国际上最先进的计算机图谱解析技术有模糊信息分析、人工神经网络、灰色关系聚类等。

　　3结语中药指纹图谱的研究，在国内外尚处于发展阶段。在研究过程中，必将会碰到许多问题。但作为中药质控的有效手段，在不久的将来，将会全面应用实施，这将推动中药的发展，为中药走向世界作出贡献。