卡介菌纯蛋白衍化物（BCG-PPD）制造及检定规程

本品系用卡介菌生产菌种经液体表面培养，杀菌过滤除去菌体，经盐析、酸沉淀方法提纯制成的冻干制品，含有从细菌培养悬液中获得的活性物质。对接受卡介苗免疫或被结核菌感染的机体，能引起特异的皮肤变态反应。用于观察卡介苗免疫反应及检查结核菌的感染。

1　菌种

1.1　由中国药品生物制品检定所分发或经同意。

1.2　制造BCG-PPD的菌种为D2BP302S11甲10，应冻干保存于2～8℃。

1.3　菌种检定

1.3.1　培养特性

于37～39℃培养时，在苏通马铃薯培养基上发育成干皱成团略呈浅黄色菌苔。在牛胆汁马铃薯琼脂培养基上为浅灰色粘膏状菌苔。在苏通培养基上卡介菌应浮于表面，为多皱、微黄色的菌膜。抗酸染色为抗酸杆菌。

1.3.2　毒力试验

用体重300～400g的同性健康豚鼠4只，各腹腔注射1ml菌液（5mg/ml），每周称体重，4～5周后解剖检查，大网膜上可出现脓疱，肠系膜淋巴结可能肿大，肝及其他脏器应无肉眼可见的结核病变。

1.3.3　安全试验

用体重300～400g的同性健康豚鼠6只，于股内侧皮下注射1ml菌液（10mg/ml），注射前称体重，注射后每周观察1次注射部位及局部淋巴结变化，每2周称体重1次。6周解剖3只，满3个月将3只豚鼠解剖，检查，应无肉眼可见的结核病变。若有可疑病灶时，应做涂片和组织切片检查，并采取部分病灶研磨，加少量生理盐水混匀，皮下注射2只豚鼠。若证明系结核病变，该菌种应废弃。若未满3个月试验豚鼠因其他疾病死亡，应解剖检查，依上法处理。若死亡2只以上，应重试。

2　制造

按《结核菌素纯蛋白衍化物（TB—PPD）制造及检定规程》2.1～2.9项进行。

3　浓缩物检定与效期

按《结核菌素纯蛋白衍化物（TB—PPD）制造及检定规程》3.1～3.8项进行。

4　BCG—PPD的稀释、分批、分装

按《结核菌素纯蛋白衍化物（TB—PPD）制造及检定规程》4.1～4.3项进行。

5　成品检定

按《结核菌素纯蛋白衍化物（TB—PPD）制造及检定规程》5.1～5.6项进行。

6　保存与效期

保存于2～8℃暗处。自稀释检定合格之日起效期为1年。