蹄疫病原检测方法

  蹄疫反转录聚合酶链反应(rt-pcr),用于检测疑似感染动物水疱皮或水疱液中所有血清型口蹄疫病毒,适用于口蹄疫病毒的检测、诊断和流行病学调查。

  原理:利用异硫氰酸胍方法提取rna,在反转录酶的作用下,以rna为模板,以引物为起点合成与rna模板互补的cdna链。利用西安天隆科技有限公司生产的dtc型基因扩增仪,在taqdna聚合酶的作用下,经高温变性、低温退火、中温延伸的循环,使特异性dna片段的基因拷贝数放大一倍。经过35个循环,最终使基因放大数百万倍。将扩增产物进行电泳,经溴化乙锭染色后,在紫外灯照射下,肉眼可见dna片段的扩增带。该方法可以检测所有亚型的口蹄疫病毒,检测结果为阳性,需进一步采用分型诊断试剂盒进行进一步检测。